基質噴涂加高壓電的重要性
基質粒徑與MALDI MS檢測靈敏度之間的關系
腦組織微區具有特異性。利用MALDI MSI觀察微區脂質等代謝小分子分布。
采用Matrix Builder基質噴涂儀,DHB基質(20 mg/mL DHB,溶劑:乙腈/水=8/2),布魯克MALDI-FTICR MSI質譜進行實驗。
具體參數如下:
(1)基質噴涂儀實驗參數如下:循環次數為8次;泵速為0.07 mL/min;掃描間距為2 mm;噴嘴溫度為 50℃;噴霧壓力為0.55 MPa;干燥時間為8 s;噴霧電壓為 0 V;基質濃度為20mg/mL;噴嘴速度為 30 mm/s;掃描方式為橫向掃描;載波臺溫度為45℃;保持時間為30 s;噴嘴高度為12 mm。
(2)MALDI-FTICR質譜分析采用Bruker SolariX質譜儀。使用NaTFA對實驗儀器進行外部校標。具體的實驗參數如下:Plate offset為100 V;Deflector Plate為180 V;Laser Shots為150 V;Laser Power為65%;Frequency為150 Hz;Laser Focus為medium;步長為100 μm。數據處理使用FlexImaging 5.0軟件(Bruker Daltonics)
圖1:質譜數據圖。由圖可見,大量的脂質分子可以被檢測到。
圖2:分子成像圖,腦微區分子分布有清晰界限
采用Matrix Builder基質噴涂儀,DHB基質,布魯克MALDI-FTICR MSI質譜進行實驗。
采用Matrix Builder基質噴涂儀,DHB基質(20 mg/mL DHB,溶劑:乙腈/水=8/2),布魯克MALDI-FTICR MSI質譜進行實驗。
具體參數如下:
(1)基質噴涂儀實驗參數如下:循環次數為8次;泵速為0.07 mL/min;掃描間距為2 mm;噴嘴溫度為 50℃;噴霧壓力為0.55 MPa;干燥時間為8 s;噴霧電壓為 0 V;基質濃度為20mg/mL;噴嘴速度為 30 mm/s;掃描方式為橫向掃描;載波臺溫度為45℃;保持時間為30 s;噴嘴高度為12 mm。
(2)MALDI-FTICR質譜分析采用Bruker SolariX質譜儀。使用NaTFA對實驗儀器進行外部校標。具體的實驗參數如下:Plate offset為100 V;Deflector Plate為180 V;Laser Shots為150 V;Laser Power為65%;Frequency為150 Hz;Laser Focus為medium;步長為100 μm。數據處理使用FlexImaging 5.0軟件(Bruker Daltonics)
圖3 質譜數據圖
圖4 部分脂質分子成像圖
采用Matrix Builder基質噴涂儀,納米顆粒TiO2基質(100nm,10 mg/mL DHB,溶劑:乙腈/水=8/2),布魯克MALDI-FTICR MSI質譜進行實驗。
具體參數如下:
TiO2基質2mg/mL溶于甲醇溶液基質噴涂儀實驗參數如下:循環次數為20次;泵速為0.08 mL/min;掃描間距為2 mm;噴嘴溫度為 50℃;噴霧壓力為0.6 MPa;干燥時間為8 s;噴霧電壓為 0 V;基質濃度為2mg/mL;噴嘴速度為 30 mm/s;掃描方式為橫向掃描;載波臺溫度為45℃;保持時間為30 s;噴嘴高度為12 mm。
圖5 TiO2對鼠腦解析的總離子流圖
圖6 TiO2對鼠腦解析的分子成像圖
(1)Anal. Chem. 2015, 87, 12, 5860–5865
(2)維科托基質噴涂應用支撐實驗室。